Gene Cloning

Vector(벡터) 

벡터란 플라스미드나 박테리오파지와 같은 DNA로서 세포 형질전환을 통해 특정 유전자나 DNA를 자신에게 삽입시켜 재조합 DNA를 만든 후 이것을 숙주세포로 전달하여 많은 수로 복제 될 수 있도록 하거나 또는 단백질로 발현될 수 있도록 하는 DNA운반체를 말한다.

Vector의 조건

1. 사본(copy)수가 많아야한다.
2. 간단히 분리 및 정제가 가능해야 한다.
3. 불필요한 유전정보를 최소화하여 작은 DNA로부터 외부 유전자 DNA를 클로닝 할 수 있어야한다.
4. 복제 원점을 가지고, 숙주세포에서 독립적인 복제가 가능해야 한다.
5. 제한효소 자리 집단(Multiple Clonning Site, MCS)이 있어야 한다.
6. 선발 표지자(selection marker)가 있어야 한다.

Clonning Vector(클로닝 벡터) 

대장균 등에 DNA를 도입하여 그 DNA의 복제사본(copy)을 다량으로 얻는데 사용된다. 이것은 재조합 DNA를 만들거나, 염기서열을 결정할 때와 같은 목적을 위해서 순수 DNA를 증식시켜서 분리 및 정제를 필요로 할 때 이용된다.

클로닝 벡터(영어: cloning vector)는 바이러스, 플라스미드 또는 고등생물의 세포에서 얻어진 작은 DNA이다. 이것은 숙주 내에서 안정적으로 유지될 수 있으며, 외부 DNA 조각을 삽입하려는 용도를 가지고 있다. 그러므로 벡터와 외부 DNA 를 제한효소 또는 ligase를 처리할 때, 벡터는 DNA를 쉽게 삽입하거나 제거할 수 있는 특징을 가져야한다.

많은 종류의 클로닝 벡터가 있지만, 대부분 플라스미드를 이용한다. 클로닝이 된 vector는 E.coli에서 발현시켜 본다. E.coli내의 클로닝 벡터는 플라스미드, 박테리오파지, 코스미드 그리고 인공박테리아염색체(BACs)가 있다. 그러나 큰 DNA조각이나 효모와 같이 다른 생물의 DNA는 E.coli내에서 안정적으로 유지되지 않는다. 효모의 클로닝벡터는 인공효모염색체(YACs)를 가진다.

Expression Vector(발현 벡터) 

도입한 DNA로부터 얻어지는 단백질 산물을 얻기 위해서 사용된다. 발현시키기 위한 프로모터나 인헨서 같은 조절 부위와 전사 종결점을 가진다. 발현시키고자 하는 단백질의 구조 유전자의 완전한 해독 틀을 포함 해야한다.